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　　必修本
　　第4课时     实验：生物组织中可溶性
　　还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
　　郑梁梅高级中学   朱靖亚
　　知识精华
　　一、可溶性还原糖的鉴定原理：
　　生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛基，因此叫还原性糖；蔗糖的分子内没有游离的半缩醛基，因此叫非还原性糖，不具有还原性。实际上本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否，而不能鉴定可溶性的非还原性糖。
　　　　可溶性还原糖与斐林试剂（质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/ml的硫酸铜溶液配制而成）混合后,可以生成砖红色沉淀。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色         棕色          砖红色
　　二、脂肪的鉴定原理：
　　鉴定生物组织中是否含有脂肪时，可用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ，苏丹Ⅲ染液遇脂肪的染色反应为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪的染色反应为红色。
　　三、蛋白质的鉴定原理：
　　鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/ml的硫酸铜溶液。在碱性溶液NaOH中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu2+ 作用，形成紫色或紫色的络合物，这个反应叫双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的存在。
　　题例领悟
　　例1：用斐林试剂鉴定可溶还原糖时，溶液的颜色变化过程为：
　　　　A、浅蓝色      棕色         砖红色 B、无色       浅蓝色        棕色
　　　　C、砖红色      浅蓝色       棕色   D、棕色       绿色          无色
　　解析：斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后，立即生成浅蓝色的Cu（OH）2沉淀。Cu（OH）2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此，答案为A
　　例2：将面团包在纱布中在清水中搓洗，鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是：
　　A、碘液、苏丹Ⅲ溶液     B、双缩脲试剂、碘液
　　C、双缩脲试剂、苏丹Ⅳ染液    D、碘液 、斐林试剂
　　解析：白浆为淀粉，淀粉遇碘变蓝，黏稠物质为蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。因此，答案为B
　　自我评价
　　一、选择题：
　　1、徒手切片时的刀口方向应是                                     （   ）
　　A、向前      B、向内        C、向左         D、向右
　　2、在鉴定蛋白质样品时，加双缩脲试剂的正确操作方法是             （   ）
　　A、先加A液，混合后再加B液     B、先加B液，混合后再加A液
　　C、A、B液混合后立即加入         D、上述方法都可以采用