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　　第二讲 细胞工程
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　　1．举例说明植物的组织培养 
　　2．简述动物的细胞培养与体细胞克隆
　　3．解释细胞融合与单克隆抗体
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　　考点梳理
　　（一）植物细胞工程 
　　1．原理：细胞全能性
　　全能性表达的难易程度：植物细胞>动物细胞（动物细胞只有细胞核具有全能性）；受精卵>生殖细胞（配子、精子、卵细胞）>体细胞； 幼嫩的细胞>衰老的细胞。在体细胞中：分化程度低的>分化程度高的 ，细胞分裂能力强的>细胞分裂能力弱的。
　　2．基本技术：植物组织培养技术，植物体细杂交技术。
　　（1）植物组织培养技术
　　① 过程：
　　
　　或细胞
　　
　　脱分化：高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程
　　再分化：愈伤组织继续培养，重新分化成根或芽等器官的过程
　　愈伤组织：排列疏松、无规则，高度液泡化的无定型状态的薄壁细胞
　　② 培养基的成分：（半）固体培养基，主要是矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素等。
　　③ 特点：
　　Ⅰ 外植体的选择：花和幼嫩的组织脱分化较为容易，而植物的茎、叶和成熟的老组织则较难。另外制备外植体时应选取有形成层的部分，因为形成层细胞易脱分化。
　　Ⅱ 严格的无菌条件：培养基上有细菌等微生物存在时，它们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此在培养过程中要求进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。
　　Ⅲ 完全的营养条件：离体的植物细胞失去了植物的自养能力，所以需要为其提供包括水、有机营养、矿质营养、维生素等营养物质。
　　Ⅳ 光照：离体的植物细胞、组织和器官脱分化形成愈伤组织时，需避光处理；而愈伤组织再分化形成植物幼苗时，需光照处理。
　　Ⅴ 激素调控：生长素含量高于细胞分裂素时，主要诱导植物组织脱分化和根原基的形成；当细胞分裂素的效应高于生长素时，主要诱导植物组织再分化和芽原基的形成。
　　④ 地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。
　　（2） 植物体细胞杂交技术
　　① 原理：细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
　　② 过程
　　
　　关键环节：
　　A．用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，  
　　获得有活力的原生质体；
　　B．原生质体间的融合：
　　融合方法：物理法（离心、振动、
　　电激）   
　　化学法（聚乙二醇PEG）
　　③  植物细胞杂交与传统细胞杂交比较：
　　 　　传统杂交　　细胞杂交
　　依据　　杂种优势　　细胞全能性、原生质体融合
　　过程　　自然发生，在母体完成胚发育　　人工诱导融合，需组织培养
　　本质　　精、卵两种生殖细胞结合，完成遗传物质的重新组合　　不同生物的体细胞融合，完成遗传物质的融合
　　优点　　杂种第一代生长整齐、植株健壮、产量高、抗虫抗病能力强　　克服远源杂交不亲和障碍，实现不同种间的杂交
　　缺点　　存在生殖隔离；杂种第二代会出现生长不齐、产量下降等现象　　很多理论、技术问题未解决，距离推广应用有一定差距
　　目的　　获得杂种优势，提高产量　　获得优良性状
　　应用范围　　种内　　种内、种间均可

　　 
　　3．植物细胞工程的实际应用：
　　（1）植物繁殖的新途径：
　　① 植物体快速繁殖
　　② 作物脱毒：取植物分生区附近，如茎尖、根尖，因很少被病毒感染，甚至无病毒，而被用来培育无病毒植株。
　　③ 制作人工种子：利胚状体 + 人工种皮
　　④ 单倍体育种：大大缩短了育种年限。