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约2640字。
　　专题5课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
　　出卷人：郝军
　　1.多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。
　　(1) DNA的两条链是反向平行的，通常将________的末端称为5′端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的________开始延伸DNA链。
　　(2) PCR利用DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到________，它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来，所用的培养基叫________。
　　(3) PCR的每次循环可以分为_______________________________________________三步。假设在PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循环后，反应物中大约有________个这样的DNA片段。
　　(4) 请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。
　　(5) 简述PCR技术的主要应用。
　　2.近10年来，PCR技术成为分子生物学实验室的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制（如图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。
　　(1) 加热使DNA双链打开，这一步是打开________键，称为________，在细胞中是在________酶的作用下进行的。
　　(2) 当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2个DNA分子，此过程中原料是______________________________，
　　遵循的原则是_____________________________________________________。
　　(3) PCR技术的必需条件，除了模板、原料、酶以外，至少还有三个条件，即：一定的缓冲溶液、适宜的________和________。
　　(4) 通过PCR技术使DNA分子大量复制，若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制4次之后，则15N标记的脱氧核苷酸链占全部脱氧核苷酸链总数的比例为________。
　　3.从第二轮循环开始,DNA聚合酶只能特异地复制____________的DNA序列,使这段____________的序列呈指数扩增。
　　4.PCR反应需要在一定的缓冲溶液中提供__________、分别与两条模板链结合的__________、__________种脱氧核苷酸、__________的DNA聚合酶。
　　5.PCR通过控制__________来控制双链的__________与__________。
　　6.__________的发现和使用大大增加了PCR的效率,使PCR技术趋向__________。
　　7.(1) PCR反应需要的条件：缓冲溶液、DNA 模板、引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶,为什么？
　　(2) 在PCR反应中与解旋酶作用相同的操作是：_______________________。
　　8.PCR利用了DNA__________原理,在__________的温度范围内,DNA的__________解体, __________分开,这个过程称为__________。