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　　《多聚酶链式反应扩增DNA片段》教案
　　教学目标：
　　（一）知识与技能
　　1、了解PCR技术的基本操作
　　2、理解PCR的原理
　　3、讨论PCR的应用
　　（二）过程与方法
　　在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中，应避免外源DNA污染，严格控制温度等反应条件
　　（三）情感、态度与价值观
　　通过对PCR实验的操作及结果分析，培养学生严谨的科学态度和实事求是的科研精神
　　教学重点：PCR的原理和PCR的基本操作
　　教学难点：PCR的原理
　　教学过程：
　　（一）引入新课
　　在现代生物技术中，DNA技术可谓是尖端技术。人类基因组计划、基因工程、基因诊断、基因检测、古生物鉴定等都离不开对DNA分子碱基序列的分析。而分析DNA碱基序列，就需要一定量的DNA片段。怎样迅速获得足够量的DNA片段呢？今天我们来研究学习DNA分子的扩增技术――PCR技术。
　　（二）进行新课
　　1．基础知识
　　PCR技术扩增DNA的过程，与细胞内DNA复制过程类似：
　　1．1细胞内DNA复制条件分析：
　　条件 组分 作用
　　模板 DNA的两条单链 提供复制的模板
　　原料 四种脱氧核苷酸 合成DNA子链的原料
　　酶 解旋酶
　　DNA聚合酶 打开DNA双螺旋
　　催化合成DNA子链
　　能量 ATP 为解螺旋和合成子链供能
　　引物 RNA 为DNA聚合酶提供合成的3’端起点
　　1．2细胞内DNA复制过程
　　（1）DNA的反向平行结构：（结合投影图）
　　核苷酸分子的结构与方向性：（分子结构模式图）
　　由核苷酸通过3,5-磷酸二酯键连接形成核苷酸长链：（模式图，体现方向性）。
　　DNA双螺旋结构的反向平行结构：
　　（2）DNA的复制过程:
　　解旋：解旋酶、ATP，DNA两条链打开，，形成两条DNA单链。
　　引物结合：在DNA单链3’端与DNA反向配对结合，确保引物3’端与DNA单链准确配对。
　　DNA聚合酶结合：
　　子链合成：DNA聚合酶从引物3’端开始，将配对的脱氧核苷酸连接起来。
　　后续加工：DNA聚合酶I将引物切去，并合成空缺处的DNA单链，再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来（半不连续合成。先导链，滞后链）
　　子链合成特点：不能从头合成；合成方向为“5’→3’合成”。
　　感悟生命的神秘：DNA聚合酶不但能够催化磷酸二酯键的形