《DNA的粗提取与鉴定》学案1

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  • 更新时间: 2012/3/3 23:49:00
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资源简介:

约2980字。

  课题1 DNA的粗提取与鉴定
  课题目标
  (一)知识与技能
  1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。
  2、理解DNA粗提取与鉴定的原理
  (二)过程与方法
  掌握DNA的提取方法,能利用DNA的性质进行实验设计和操作
  (三)情感、态度与价值观
  通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。
  课题重点
  DNA的粗提取和鉴定方法
  课题难点
  DNA的粗提取和鉴定方法
  教学方法
  启发式教学
  教学工具
  多媒体课件
  教学过程
  (一)引入新课
  无论是果胶酶还是加酶洗衣粉中的酶制剂,都是从细胞中提取出来的。从今天开始,我们学习生物化学成分的提取与改造技术。
  (二)进行新课
  1.基础知识
  1.1DNA粗提取的原理
  提取DNA的原理包括DNA的溶解性和耐受性两个方面。问:提取DNA的溶解性原理包括哪些方面?
  DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。
  1.1.1 分析图5-1。DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点?要使DNA溶解,需要使用什么浓度?要使DNA析出,又需要使用什么浓度?
  在0.14mol/L时溶解度最小;较高浓度可使DNA溶解;0.14mol/L可使DNA析出。
  1.1.2 在溶解细胞中的DNA时,人们通常选用2mol/LNaCl溶液;将DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中缓慢注入蒸馏水,以稀释NaCl溶液。酒精是一种常用有机溶剂,但DNA却不能溶于酒精(特别是95%冷却酒精),但细胞中蛋白质可溶于酒精。问:采用DNA不溶于酒精的原理,可以达到什么目的?
  将DNA和蛋白质进一步分离。
  1.1.3提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时,应选用怎样的酶和怎样的温度值?
  蛋白酶,因为酶具有专一性,蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。温度值为60~80℃,因为该温度值蛋白质变性沉淀,而DNA不会变性。
  补充:DNA的变性是指DNA分子在高温下解螺旋,其温度在80℃以上,如在PCR技术中DNA变性温度在95℃。
  思考:观察图5-2,洗涤剂在提取DNA中有何作用?
  洗涤剂将细胞膜上的蛋白质,从而瓦解细胞膜。
  1.2DNA的鉴定原理
  当鉴定提取出的物质是否是DNA时,需要使用什么指示剂进行鉴定?
  在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色。
  原理总结。通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以从细胞中提取和提纯DNA;再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分离开来,达到提纯的目的;最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。

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