《DNA的粗提取与鉴定》学案1
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约2980字。
课题1 DNA的粗提取与鉴定
课题目标
(一)知识与技能
1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。
2、理解DNA粗提取与鉴定的原理
(二)过程与方法
掌握DNA的提取方法,能利用DNA的性质进行实验设计和操作
(三)情感、态度与价值观
通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。
课题重点
DNA的粗提取和鉴定方法
课题难点
DNA的粗提取和鉴定方法
教学方法
启发式教学
教学工具
多媒体课件
教学过程
(一)引入新课
无论是果胶酶还是加酶洗衣粉中的酶制剂,都是从细胞中提取出来的。从今天开始,我们学习生物化学成分的提取与改造技术。
(二)进行新课
1.基础知识
1.1DNA粗提取的原理
提取DNA的原理包括DNA的溶解性和耐受性两个方面。问:提取DNA的溶解性原理包括哪些方面?
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。
1.1.1 分析图5-1。DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点?要使DNA溶解,需要使用什么浓度?要使DNA析出,又需要使用什么浓度?
在0.14mol/L时溶解度最小;较高浓度可使DNA溶解;0.14mol/L可使DNA析出。
1.1.2 在溶解细胞中的DNA时,人们通常选用2mol/LNaCl溶液;将DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中缓慢注入蒸馏水,以稀释NaCl溶液。酒精是一种常用有机溶剂,但DNA却不能溶于酒精(特别是95%冷却酒精),但细胞中蛋白质可溶于酒精。问:采用DNA不溶于酒精的原理,可以达到什么目的?
将DNA和蛋白质进一步分离。
1.1.3提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时,应选用怎样的酶和怎样的温度值?
蛋白酶,因为酶具有专一性,蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。温度值为60~80℃,因为该温度值蛋白质变性沉淀,而DNA不会变性。
补充:DNA的变性是指DNA分子在高温下解螺旋,其温度在80℃以上,如在PCR技术中DNA变性温度在95℃。
思考:观察图5-2,洗涤剂在提取DNA中有何作用?
洗涤剂将细胞膜上的蛋白质,从而瓦解细胞膜。
1.2DNA的鉴定原理
当鉴定提取出的物质是否是DNA时,需要使用什么指示剂进行鉴定?
在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色。
原理总结。通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以从细胞中提取和提纯DNA;再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分离开来,达到提纯的目的;最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。
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