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　　高考第一轮复习讲学稿二二
　　DNA的粗提取与鉴定（选修IP54）
　　一、实验目的：初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。
　　二、实验原理：
　　1．DNA的溶解性：
　　思考题1：DNA在氯化钠溶液中的溶解度有什么特点？对此有什么应用？
　　思考题2：利用什么原理来将DNA与蛋白质分离开？
　　2．DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60~80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。
　　3．细胞在蒸馏水中易吸水而导致细胞膜和细胞核膜的破裂，据此可得到含有核DNA的溶液。
　　4．DNA的鉴定：
　　思考题3：依据什么原理来鉴定DNA？
　　三、实验材料：鸡血细胞液
　　思考题4：生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，他们能否选用牛、羊、马血做实验材料？为什么？
　　四、实验步骤：
　　1．制备鸡血细胞液：在鸡血中加入质量浓度为0．1g/mL的柠檬酸钠溶液，离心处理；
　　2．提取鸡血细胞的细胞核物质：向鸡血细胞液中加入蒸馏水，搅拌、过滤；
　　思考题5：加入蒸馏水的目的是什么？为什么能达到此目的？
　　3．溶解细胞核内的DNA：加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态；
　　4．析出含DNA的黏稠物：加入蒸馏水，用玻璃棒搅拌；
　　思考题6：此时加入蒸馏水的目的是什么？
　　5．滤取含DNA的黏稠物：过滤；
　　思考题7：这次过滤与上次过滤的目的一样吗？为什么？
　　6．将DNA的黏稠物再溶解：加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态；
　　7．过滤含有DNA的氯化钠溶液：过滤；
　　思考题8：这一步骤的目的是什么？
　　思考题9：为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？
　　8．提取含杂质较少的DNA：加入冷却的95%的酒精，搅拌；
　　思考题10：这一步骤的目的是什么？
　　思考题11：为什么加入的酒精需要冷却的？
　　9．DNA的鉴定：取两支试管，各加入0．015mol/L的氯化钠溶液5mL，一支加入提取的DNA，两支各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后置于沸水中加热。
　　思考题12：为什么要设置对照组？实验中能观察到什么现象？
　　五、课堂练习：
　　1．为了便于提取鸡血细胞中的DNA，下列所采取的措施中，最恰当的是：向经抗凝剂处理的鸡血液加入    （    ）
　　A．蒸馏水 B．ATP C．0.3g/mL的蔗糖溶液            D．二氧化碳
　　2．下列不适宜作为DNA提取的实验材料是                                   （    ）
　　A．鸡血细胞    B．蛙的红细胞    C．人的成熟红细胞    D．菜花
　　3．用过滤的方法得到细胞中的氯化钠溶液后，还要用酒精处理，可以得到较纯化的DNA．这是因为：                                                             （    ）
　　A．DNA易溶于酒精，而滤液中某些杂质不易溶于酒精