《蛋白质的提取和分离》学案

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  • 更新时间: 2011/1/18 11:09:56
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约3060字。

  《蛋白质的提取和分离》学案
  [课标要求]
  尝试蛋白质的提取和分离
  [知识梳理]
  一.背景知识
  1.常用的蛋白质分离提纯技术有                 和                    等。其中             技术最为快捷灵敏,简便易行。
  2.电泳现象:                                                             。
  3.电泳技术分离蛋白质的原理:                                           
  。
  4.聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE):                                            。
  二.实践案例——血清蛋白的提取和分离
  1.材料用具(略)
  2.活动程序
  (1)点样: 新配制血清5μL,与 质 量 浓 度 为0.4g/mL的 蔗 糖 溶 液 及 质 量 分 数为             的          指示剂等体积混匀后,用              加样器吸取5μL样品,小心加到电泳样品槽的胶面上。
  (2).电泳:打开稳压稳流电泳仪的电源,将电流调节至               mA,待样品进入分离胶后,改为               mA,当溴酚蓝前沿距离硅胶框下缘              时,将电流调回零。关闭电源。
  (3).染色:取出凝胶,放入质量分数为               的              中,染色与            同时进行,使染色液没过胶板,染色              。
  (4).脱色:用体积分数为                  的                 浸泡漂洗数次,每隔           更换脱色液,直至底色脱净,背景清晰。
  (5).烘干胶板:将已脱色的凝胶板放在保存液中浸泡              然后将凝胶板放在两层透气玻璃纸中间,自然干燥即可获得血清蛋白的电泳谱带。
  3.结果分析
  (1)分析没有出现电泳谱带的原因
  (2)通过辨认电泳谱带可初步判断血清中蛋白质的种类
  三.探究活动
  1.牛奶中酪蛋白的提取和检测
  提取原理:当pH=             时,酪蛋白的溶解度降低,并析出沉淀。用          除去酪蛋白中的脂肪后,即得到纯的酪蛋白。
  检测原理:酪蛋白中的酪氨酸,能与               起颜色反应,首先生成白色沉淀,加热后变成               。
  2.卵清蛋白的分离
  用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分离(同上)
  四.意义
  1.胰岛素的提纯
  2.对细胞癌变做出诊断
  [复习指导]
  本节课复习以聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)为例,以电泳技术分离蛋白质的原理为基础,

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