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　　专题一   基因工程
　　§1.1   DNA重组技术的基本工具
　　基因工程又叫                         ，指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和            等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。其操作水平是在                         上进行设计和施工，操作环境是在生物体外。
　　一．限制性核酸内切酶——“分子手术刀”
　　(1)主要来源：         生物。
　　(2)特点：能够识别DNA特定的                      ，切开两个核苷酸之间的                 。
　　(3)DNA末端：限制酶切割DNA产生的DNA末端有两种形式：                 和             。
　　二．DNA连接酶——“分子缝合针”
　　(1)作用：将双链            “缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的            。
　　(2)种类  ①E•coli DNA连接酶：只能缝合DNA的                 。
　　②T4DNA连接酶：即可缝合DNA的黏性末端，又可缝合双链DNA的            。
　　三．基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
　　(1)种类 ①质粒：是一种裸露、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有        能力的         。
　　②               的衍生物。
　　③动植物病毒。
　　(2)质粒载体的特点
　　①能够在细胞内                 。
　　②具有一个或多个                             ，便于供外源DNA片段插入其中。
　　③具有特殊的                         ，供重组DNA的鉴定和选择。
　　(3)质粒载体的处理：真正被用作载体的质粒，都必须在天然质粒的基础上进行                。
　　限制性核酸内切酶与DNA连接酶的比较
　　限制性核酸内切酶 DNA连接酶
　　E•coli DNA连接酶 T4DNA连接酶
　　来源 大多是原核生物 大肠杆菌 T4噬菌体
　　作用 (1)识别双链DNA分子的特定核苷酸序列
　　(2)切开特定部位的两个核苷酸间的磷酸二酯键 双链DNA片段互补的黏性末端之间连接 既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，也连接平末端，但后者效率低
　　结果 形成黏性末端或平末端 “缝合”互补的双链DNA片段
　　实质 使特定部位的两核苷酸间的磷酸二酯键断开 恢复被限制酶切开了的两核苷酸之间的磷酸二酯键
　　§1.2、基因工程的基本操作程序
　　一．目的基因的获取
　　(1)概念：指编码蛋白质的                。
　　(2)获取方法 
　　①从基因文库中获取目的基因
　　a．基因文库的含义：将含有某种生物不同基因的许多                 ，导入             的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。
　　b.基因文库和种类
　　②利用PCR技术扩增目的基因
　　a．含义：是一项在生物体外         特定DNA片段的核酸合成技术。
　　b．条件：已知基因的                     。