生物三轮体系实验复习:温度、pH对酶活性影响的实验过程及试剂使用比较

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约940字。

  实验六 温度、pH对酶活性影响的实验过程及试剂使用比较
  1、温度对酶活性的影响
  序号 项  目 试管代号
  1 2 3
  1 注入2mL可溶性淀粉溶液 √ √ √
  2 放入不同的环境5min 60℃热水 沸水 冰块
  3 注入1mL新鲜淀粉酶摇均,维持5min √ √ √
  4 滴入1滴碘液 √ √ √
  5 观察试管中颜色有何变化
  6 结果 不变色 变蓝 变蓝
  【注意】本实验不能用斐林试剂作鉴定试剂,因为使用斐林试剂需要水浴煮沸,3号试管是低温处理,酶没有失活,加入斐林试剂后,在由0~100℃加热过程中,淀粉酶会恢复活性,催化淀粉水解,产生麦芽糖等还原性糖,也生成了砖红色沉淀,无法说明低温是否对酶活性有影响。
  2、pH对酶活性的影响
  序号 项  目 试管代号
  1 2 3
  1 注入1mL新鲜淀粉酶溶液 √ √ √
  2 注入1mL蒸馏水 √
  3 注入1mL氢氧化钠 √
  4 注入1mL盐酸 √
  5 注入2mL可溶性淀粉溶液 √ √ √
  6 振荡3支试管浸入60℃热水中 √ √ √
  7 加2mL斐林试剂 √ √ √
  8 放沸水中煮5min √ √ √
  9 观察试管中颜色有何变化
  10 结果 砖红色 浅蓝色 浅蓝色
  【注意】本实验不能用碘液作鉴定试剂,因为I2不能长时间留在碱液中,I2会与NaOH发生化学反应,很快生成NaI(碘化钠)和NaIO(次碘酸钠),使I2与淀粉生成蓝紫色络合物的机会大大减少,从而影响实验的观察效果。
  3、酶促反应的影响因素
  ①酶浓度对酶促反应的影响:在底物足够,其它条件适宜的条件下,反应过程中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时,酶促反应的速度与酶浓度成正比,如下图所示。
  ②底物浓度对酶促反应的影响:在底物浓度较低时,反应速度随底物浓度增加而加快,反应速度与底物浓度近乎:成正比,在底物浓度较高时,底物浓度增加,反应速度也随之加快,但不显著;当底物浓度很大且达到一定限度时,反应速度就达到一个最大值,此时即使再增加底物浓度,反应也几乎不再改变。如下图所示。
  ③pH对酶促反应的影响:每一种酶只能在一定限度的pH范围内才表现活性,超过这个范围酶就会失去活性。其特点如下图中曲线变化所示。在一定条件下,每一种酶在某一定PH时活性最大,这个pH称为这种酶的最适pH。如下图所示。
  ④温度对酶促反应的影响:酶促反应在一定温度范围内反应速度随温度的升高而加快;但当温度升高到一定限度时,酶促反应速度不仅不再加快反而随着温度的升高而下降。在一定条件下,每一种酶在某一定温度时活性最大,这个温度称为这种酶的最适温度,如下图所示。

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