马铃薯组织培养

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约3790字。

  马铃薯组织培养
  1、繁殖瓶苗
  将待繁脱毒苗在无菌条件下每叶节切一段,接种在仅含大量元素、微量元素和铁盐的无激素MS固体或液体(可用纸桥)培养基的组培瓶中,置培养室内培养。培养条件为:光照1000-3000lx,光周期13-16h/d,培养温度(25±2)℃,空气相对湿度50%-60%,自然通风。叶节段接种30-50d后长成3-5片叶的幼苗。记录苗芽发生时间,生长状况,污染率。再按照上述方法重复进行扩繁,直到达到要求繁殖数量为止。
  2、繁殖微型薯
  将上述具有3-5片叶幼苗,加入液体培养基(MS+BA2-10mg/L)或(MS+BA2-10mg/L+IAA1mg/L+CCC100-500mg/L+糖80-100g/L),放入培养室,遮光全黑暗或光照时数少于8h/d,温度(20±2)℃,空气相对湿度50%-60%,自然通风。
  经40-70d后,在植株叶腋处长出微型薯。记录微型薯发生时间,生长状况,污染率。
  马铃薯组织培养及原原种生产技术
  摘要:本文作者根据自己多年的工作经验,详细地介绍了马铃薯组织培养方法和原原种生产技术。
  关键词:马铃薯    组织培养    原原种    生产    技术
  病毒和类病毒的累积性感染是引起马铃薯种性退化的重要因素,而通过组织培养获取无病毒种薯来恢复种性的方法已被马铃薯生产地区广泛采用。现将马铃薯组织培养方法和原原种生产技术介绍如下:
  1   马铃薯组织培养
  1.1外植体培养
  从已催出芽(芽长一般2—4cm)的干净健康马铃薯块茎上掰下芽,用自来水冲洗干净,放入0.1—0.15%的升汞溶液中浸泡8—10分钟,在超净工作台上消毒完后,放入无菌水中浸泡6次,每次5分钟,然后接种到MS+6-BA1.5mg/L(毫克/升)+GA30.5mg/L+IBA0.5mg/L+琼脂8g/L+蔗糖30g/L(PH值为5.8)的培养基上,每个培养瓶接种1—5个外植体。
  1.2茎尖剥离及初代培养
  外植体培养20天后,在超净工作台上解剖镜下用解剖针将生长点0.1——0.5mm部分剥离出S+肌醇100mg/L+6-BA1.5mg/L+GA30.5mg/L+泛酸钙1.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L+活性炭0.17g/L(PH值为5.8)的培养基上,每个培养瓶接种4—5个生长点。光照保持3000—6000Lux(勒克斯)左右,每天照光13—16小时 ,温度控制在23℃,经2—6个月左右培养诱导,其间转接2——3次,生长点即可长成新的小植株。经病毒检测不带病毒的株系就可进行扩繁,未脱毒的株系淘汰。
  1.3试管苗扩繁
  1.3.1扩繁前的准备
  1.3.1.1扩繁培养基的制备。扩繁培养基以MS培养基为扩繁基本培养基,外加6—BA0.5mg/L+NAA0.5-1.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L+活性炭0.17g/L,pH值为5.8。
  1.3.1.2把接种用具在超净工作台上用紫外线灯消毒20—30分钟,关掉紫外线灯,打开日光灯和吹风机。
  1.3.1.3用肥皂把手洗干净并擦干,再用75%酒精消毒,待手上酒精干后,点上酒精灯,把剪子、镊子培养皿等所需用具在酒精灯上进行消毒。
  1.3.2接种扩繁

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